Εργαστήριο Μοριακής Φαρμακολογίας

Ερευνητική Δραστηριότητα (στα πλαίσια του έργου)

Βελτιστοποίηση συνθηκών και προσαρμογή στις απαιτήσεις των εκάστοτε χρηστών και των υποψηφίων βιοδραστικών μορίων.

Πειράματα in vitro αξιολόγησης της βιοδραστικότητας ενώσεων με πιθανή δράση σε ενδοθηλιακά, αγγειακά λεία μυϊκά και καρκινικά κύτταρα: α) αξιολόγηση της επίδρασής τους στον πολλαπλασιασμό, την επιβίωση και β) αξιολόγηση τροποποίησης της λειτουργίας χαρακτηριστικών βιοχημικών και σηματοδοτικών μονοπατιών, τα οποία καθορίζουν/χαρακτηρίζουν την λειτουργία αυτών των κυττάρων και τροποποιούνται σε παθοφυσιολογικές συνθήκες. Για πολύ μικρό αριθμό «μορίων οδηγών», προβλέπεται χαρακτηρισμός ex vivo / in vivo.
Για παράδειγμα, πιθανοί τροποποιητές της διαλυτής γουνυλικής κυκλάσης (sGC) χαρακτηρίζονται όσον αφορά τον μηχανισμό επίδρασής τους στην αύξηση των επιπέδων του κυκλικού (cGMP) με μεθοδολογία ELISA. Μόρια με πιθανή προ/αντι-φλεγμονώδη δράση αξιολογούνται για επίδραση σε φλεγμονώδη σηματοδοτικά μονοπάτια με ανάλυση κατά Western ή μελετάται η δράση τους στην έκφραση μορίων προσκόλλησης λευκοκυττάρων σε ενδοθηλιακά κύτταρα, δηλ. σε αντιδράσεις που εκκινούνται από τις κυτταροκίνες TNFα και IL-1β. Για επίδραση σε αγγειογένεση μελετάται η δράση τους σε κύτταρα HUVECs και στην ικανότητα πολλαπλασιασμού και δημιουργίας δικτύων in vitro.
Συνολικά για την αξιολόγηση χρησιμοποιούνται ποικίλες καλλιέργειες, όπως πχ πρωτογενών κυττάρων από φλέβα ομφαλίου λώρου ανθρώπου (HUVECs), η κυτταρική σειρά A7r5 από αορτή φυσιολογικών επιμυών (RAoSMC), είτε καλλιέργειες καρκινικών σειρών, όπως κυττάρων LNCaP (ανθρώπινα επιθηλιακά καρκινικά κύτταρα προστάτη).
Σε όλες τις περιπτώσεις, γίνεται και δοκιμή τοξικής επίδρασης των εκάστοτε ουσιών στα κύτταρα in vitro, πχ με την χρήση της χρωστικής ΜΤΤ και της ικανότητας προσκόλλησης στο τρυβλίο.

Συμμετοχή στις Ενότητες Εργασίας

Π6.4 Κυτταρικής βιοδραστικότητα των εξεταζόμενων ουσιών
Π6.5 Προκλινική φαρμακολογική ανάλυσης ουσιών in vitro & in vivo
Π6.6 Προκλινική τοξικολογική ανάλυση ουσιών in vitro

Παροχή Υπηρεσιών προς Εξωτερικούς Χρήστες (στα πλαίσια του έργου)

Τροποποιητές της sGC που ήδη αξιολογήθηκαν και αξιολογούνται προέρχονταν από το Εργ. Φαρμακευτικής Χημείας του Παν/μίου Πατρών, που δεν είναι μέρος του δικτύου INSPIRE.
Αξιολογήθηκε επίσης εκτενώς, προερχόμενος από το ίδιο Εργαστήριο, μόριο-αναστολέας του πυρηνικού υποδοχέα / μεταγραφικού παράγοντα COUP-TF II στην βιωσιμότητα και λειτουργικότητα των ανθρώπινων ενδοθηλιακών κυττάρων HUVECs και καρκινικών κυττάρων LNCaP.

Διαθέσιμος Εξοπλισμός

Εξοπλισμός απομόνωσης πρωτογενών κυττάρων και ανάπτυξης κυτταρικών καλλιεργιών είτε πρωτογενών κυττάρων είτε σειρών (θάλαμος νηματικής ροής, επωαστές, υδατόλουτρα κλπ).
Οργανο ανάγνωσης τρυβλίων ELISA (96-well ELISA plate reader), φθορισμόμετρο ανάγνωσης τρυβλίων πολλαπλών θέσεων, για τρυβλία 96-θέσεων (αριστερά κάτω), όργανο ανάγνωσης χημειοφωταύγειας τρυβλίων 96 θέσεων (δεξιά κάτω).
Βασικά εργαστηριακά όργανα, όπως όργανα ανάλυσης πρωτεϊνών κατά Western, vortex, plate shakers, επωαστής ανάπτυξης βακτηρίων για ανάπτυξη πλασμιδίων, κλπ

Ενδεικτικές Δημοσιεύσεις